microRNA Isolation Kit——分离miRNA或靶mRNA---上海赛可锐生物

microRNA Isolation Kit——分离miRNA或靶mRNA
microRNA(miRNA)虽然只有22个左右的碱基，但是在基因表达调控中起着至关重要的作用，参与细胞分化、个体发育，且与多种疾病相关。因此对于miRNA的研究越来越多。传统的miRNA分离方法是结合了基于酚/胍的样品裂解和硅胶膜离心柱，直接将总RNA分离出来，不能直接分离出miRNA。
Wako的miRNA纯化试剂盒能够制备高纯度的miRNA片段，在细胞中，成熟的miRNA分子可与Argonaute(Ago)蛋白家族形成RNA沉默复合体(RISC)，此纯化试剂盒利用免疫沉淀方法，与Ago蛋白结合抗体的特异性，分离miRNA。纯化的miRNA片段含有非常少的rRNA和tRNA降解片段。与传统的miRNA纯化方法相比，有效提高了miRNA的克隆效率。纯化的miRNA可用于分析miRNA的靶mRNA。
n  特点
1)      内源性Ago蛋白的免疫沉淀
2)      高度纯化与Ago蛋白结合的miRNA
3)      其他RNAs的污染少，比如rRNA & tRNA
4)      纯化的microRNA片段可用于高效的microRNA克隆和微阵列
5)      可同时分离miRNA和靶mRNA，便于直接进行后续的靶mRNA的克隆和定量分析
 

与常规方法比较

使用例1：
图1：使用microRNA Isolation Kit,Human Ago2纯化microRNA片段
从培养的人类细胞系（HeLa,HepG2,HEK293）中纯化的microRNA片段用Urea-PAGE和银染方法（Wako Cat. No. 311-03961；CLEAR STAIN Ag）检测。每个细胞系的数目大约是5×106。上样量是用该试剂盒纯化后获得的5ul microRNA溶液（制备的溶液一般是10ul）。

  siRNA药理研究
将小分子干扰RNA（siRNA）直接注入细胞中，这些siRNA结合蛋白元件，也可形成RISC，此试剂盒也可纯化与Ago2结合的siRNA，便于后续的siRNA研究分析。因此此试剂盒不仅能分离miRNA，亦可作用于siRNA，大大拓宽了试剂盒的使用范围。
 
后续研究：
1）RNAi的抑制效果
2）siRNA的药代过程
3）体内siRNA的稳定性
4）毒性/副作用
5）对于非特异性mRNAs的脱靶效应

 
货号               品名                                              规格
 291-70201microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1 10tests      
292-66701 microRNA Isolation Kit, Human Ago2 10tests    
292-67301 microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2     10tests    
297-70301 microRNA Isolation Kit, Human Ago3 10tests  
290-66501 microRNA Cloning Kit 8tests    
298-65103 Single Strand DNA Ligase, Thermostable, recombinant, Solution                  200units   
292-65101 Single Strand DNA Ligase, Thermostable, recombinant, Solution                          500units  
298-67901 PCR Purification Kit            30tests 
298-68001 Target mRNA Cloning Kit            10tests
上海赛可锐生物是一家专业的实验室产品供应商。公司可提供超百万种的各类化学标准品，杂质对照品，化学试剂，生物试剂等科研用品，包括2H（氘代）、13C、15N、17O和18O等同位素产品，产品种类齐全，包括：无机物、有机物、糖类、脂肪酸、氨基酸、维生素、胆汁酸、儿茶酚胺、类固醇、药物中间体标品及其系列同位素产品。主要客户广泛分布于制药、食品、政府机构、第三方检测机构、化工、科研、临床等行业。公司目前已与国内外众多品牌建立了稳定的业务往来，代理百余种国内外知名品牌：

同位素：CIL、IsoScienses、ALsachim、CDN、Isolife、Omicron、Medical Isotopes、Witega
药物类：TRC、TLC、USP、EP、BP、JP、LGC、Clearsynth、中检院
环境及标液：DRE、Wellington、Accustandard、Inorganic Venture、CPA、Reagecon、o2si
脂质类：NUCHEK、Lardon、Avanti、Matreya
植体类： PhytoLab、CaroteNature、Chromadex
糖类：Oligo-tech、IsoSep、TDB、Iduron、 Dextra、LUDGER、 Megazyme、Synthose
材料类：NIST、ERM、Spherotech、Phosphorex、MAGSPHERE、Nanocs
分子生化：Norgen、MCE、Fitzgerald、R&D、Omega、Enzo、TakaRa
细胞生物学：BioVision、ProSpec、PeproTech、Cayman、Cell signaling
免疫学：Abnova、Jackson、Mabtech、Biosensis、PeproTech、Enzo
其他：WAKO、赛默飞、ChemService、AOCS、Sigma、Chiron、APSC、PSS、TCI、............

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